Problema nº 7: Alteração na altura do pico HPLC para um ou mais picos
A alteração da altura do pico HPLC, seja para um ou mais picos podem ocorrer por diversas causas, como: eficiência da coluna, mudança no processo de separação da amostra, vazamento, volume inconsistente, configuração, lâmpada ou contaminação no detector.
Nesse artigo, detalhamos essas possíveis causas e indicamos as formas de resolver:
| Causa provável | Solução do problema |
| 1. Um ou mais componentes da amostra deterioraram ou a eficiência da coluna caiu. | Use uma amostra fresca ou padrão para confirmar a origem do problema. Se alguns ou todos os picos ainda estão menores que o esperado, substitua a coluna. Se a nova coluna melhorar os resultados, tente recondicionar a coluna antiga, seguindo o procedimento do fabricante. Se a performance da coluna antiga não melhorar, será necessário seu descarte. |
| 2. Mudanças no processo de preparação da amostra. Diferenças na matriz podem afetar a altura dos picos. | Verifique o processo de preparação de amostra e elimine os efeitos de matriz como possível causa do problema. |
| 3. Vazamento, especialmente entre a saída do injetor e a entrada da coluna (tempo de retenção também pode mudar). | Verifique o sistema por conexões soltas. Verifique se há vazamento na bomba, formação de cristais de sal e barulhos incomuns. Troque os selos da bomba se necessário. |
| 4. Volume de amostra inconsistente. | Certifique-se que as amostras são tem volumes consistentes. Para um determinado volume do tubo de carregamento da amostra, utilize de 2 a 3 vezes o seu volume em amostra para certificar-se de que o tubo de carregamento está completamente cheio. Certifique-se que os vials na bandeja do amostrador automático estão com volume suficiente de amostra. Verifique nos injetores tipo seringa por bolhas de ar. Em sistemas com um passo de lavagem ou limpeza, certifique-se que a solução de lavagem não se precipita em contato com os componentes da amostra. |
| 5. Detector ou configuração do detector sofreu alteração. | Verifique as configurações do detector. |
| 6. Lâmpada do detector fraca. | Substitua a lâmpada. |
| 7. Contaminação na célula do detector. | Limpe a célula. |
Confira também os posts detalhados que estamos fazendo dos outros problemas do guia em nosso blog nesse link.
