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Biomonitoramento de hidroxipireno

Um bom biomarcador para a medição da quantidade de hidrocarbonetos aromáticos policíclicos é a medida do hidroxipireno.

Selecionamos uma metodologia que utiliza um sistema de HPLC com detector de fluorescência, forno de colunas e injetor automático. A coluna é de custo bastante acessível, uma coluna C18 com sílica comum. A preparação da amostra irá depender da matriz de estudo.

Os hidrocarbonetos aromáticos policíclicos (HAP) são um grande grupo de poluentes orgânicos ambientais importantes que ocorrem em todos os lugares e são tipicamente mais concentrados perto dos centros urbanos.

Suas concentrações se correlacionam com o a intensidade do tráfego e a combustão do combustível fóssil. Devido às suas propriedades mutagênicas e pro carcinogênicas para humanos e animais, são rotineiramente monitorados em diferentes matrizes (ar, água, sedimento, tecidos animais, etc.). A Agência de Proteção Ambiental dos EUA promulgou dezesseis HAP não substituídos como poluentes prioritários. O monitoramento da soma destes poluentes prioritários é frequentemente utilizado para a avaliação da ocorrência de HAP no ecossistema.

Existem muitas fontes de HAP no ecossistema aquático que incluem águas residuais de atividades industriais, escoamento urbano e rural, produção de combustíveis fósseis, derramamento de petróleo durante o transporte, resíduos de lixões de lixo ou deposição atmosférica. Os hidrocarbonetos aromáticos policíclicos que entram no ambiente aquático, devido à sua hidrofobicidade, tornam-se rapidamente associados à partículas em suspensão e sedimentos.

Os hidrocarbonetos aromáticos policíclicos penetram nos animais aquáticos, especialmente através do trato gastrointestinal (alimento, água e sedimentos) ou através da difusão passiva através das brânquias e da superfície corporal. Na maioria dos animais aquáticos, eles são rapidamente metabolizados em produtos solúveis em água e eliminados do organismo. A capacidade de bioacumulação da HAP é muito variável e foi observada principalmente nos primeiros níveis tróficos. Nos peixes, as HAP são biotransformadas predominantemente pelo fígado através de reações de oxidação (fase I) e conjugação (fase II) a metabólitos hidrofílicos que são posteriormente depositados na vesícula biliar e excretados do organismo pela bile [8]. Muitos estudos experimentais e em campo demonstraram que os metabólitos biliares de HAP são medidas sensíveis e se correlacionam bem com a exposição à HAP em peixes. Muitos estudos identificaram o 1-hidroxipireno (1-OHP) como um dos compostos mais abundantes presentes na bile do peixe e este metabolito é considerado o melhor indicador geral da exposição a curto prazo de HAP em peixes. Uma gama de técnicas analíticas está disponível para a determinação dos metabolitos biliares de HAP dos peixes. O ensaio de rastreio mais rápido é o ensaio de fluorescência simples (detecção de fluorescência fixa ou espectrometria de fluorescência síncrona). Este método é adequado para o rastreio de amostras de bile de peixe in situ em locais de campo, onde incidente de poluição de HAP ocorreu (por exemplo, derramamento de óleo). No entanto, as técnicas de fluorescência não são capazes de quantificar metabólitos específicos na matriz biliar complexa. A fim de proporcionar a determinação seletiva e quantitativa de metabolitos biliares, é necessária a separação cromatográfica. Antes da separação cromatográfica, a amostra biliar é tipicamente sujeita a várias formas de pré-tratamento (hidrólise enzimática, extração em fase sólida, ou derivatização).

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Fonte: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3925601/