Problema no formato dos picos HPLC – Variações no tempo de retenção
Para resolver esse problema no formato do pico, veja se a questão é uma das listadas abaixo e siga os passos para resolvê-la:
| Causa provável | Solução do problema |
| 1. Vazamento. | Verifique se o sistema não apresenta conexões soltas. Verifique se há vazamento na bomba, formação de cristais de sal ou barulhos incomuns. Troque os selos da bomba se necessário. |
| 2. Mudança na composição da fase móvel. Pequenas mudanças podem levar a grandes mudanças nos tempos de retenção. | Verifique o preparo da fase móvel. Se a fase móvel é misturada em um equipamento, realize a mistura manualmente e alimente a fase móvel a partir de um único reservatório. |
| 3. Ar preso na bomba. Tempos de retenção aumentam e diminuem em tempos aleatórios. | Purgue o ar do cabeçote da bomba ou válvula de retenção. Troque os selos da bomba se necessário. Certifique-se que a fase móvel foi degaseificada. |
| 4. Flutuações na temperatura da coluna. | Utilize um forno de coluna confiável ou isole termicamente a coluna. |
| 5. Sobrecarga da coluna. Tempos de retenção geralmente diminuem quando a massa de soluto injetada na coluna excede a capacidade da coluna. | Injete um volume menor de amostra ou trabalhe com suas diluições. |
| 6. Solvente da amostra incompatível com a fase móvel. | Ajuste o solvente. Sempre que possível, utilize o próprio solvente da fase móvel na preparação das amostras. |
| 7. Problema na coluna. Não é uma causa comum de retenção instável. Conforme a coluna envelhece, tempos de retenção vão diminuindo gradativamente. | Substitua a coluna por uma nova do mesmo tipo para confirmar que a causa do problema é a coluna. Descarte a coluna antiga se os procedimentos de regeneração não forem bem-sucedidos. |
Confira também os posts detalhados que estamos fazendo dos outros problemas do guia em nosso blog nesse link.
